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一、實(shí)驗(yàn)介紹

gRNA識(shí)別並結(jié)合在目標(biāo)基因區(qū)域引導(dǎo)Cas9蛋白隊(duì)結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行切割，引起DNA雙鏈斷裂(DSB)，觸發(fā)細(xì)胞自身的非同源末端修復(fù)機(jī)制(NHEJ)，NHEJ修復(fù)的過(guò)程中往往會(huì)產(chǎn)生DNA的插入或刪除(Indel)，造成移碼突變，致使基因功能喪失，從而實(shí)現(xiàn)基因敲除

二、實(shí)驗(yàn)週期

45-60 工作日

三、交付標(biāo)準(zhǔn) 

篩選獲得的單克隆細(xì)胞二份、測(cè)序結(jié)果

四、客戶提供 

序列/菌株及信息;敲除基因的名稱(chēng)或敲除序列

五、實(shí)驗(yàn)流程

細(xì)胞鑑定     gRNA設(shè)計(jì)     CRISPR/Cas9載體構(gòu)建       gRNA靶點(diǎn)活性檢測(cè)    

基因敲除細(xì)胞系構(gòu)建       基因型鑑定