溴化乙錠染液是檢測DNA/RNA最常用的染料。EB是DNA嵌入劑，嵌入在DNA雙螺旋堿基之間。DNA吸收254nm處的紫外輻射并傳遞給染料，而被結(jié)合的染料本身吸收302nm和366nm的光輻射。被吸收的能量在可見光譜紅橙區(qū)的590nm處重新發(fā)射出來。溴化乙錠-DNA復(fù)合物的熒光產(chǎn)率比沒有結(jié)合DNA的染料高出20-30倍。
溴化乙錠（Ethidium Bromide, EB）是一種多環(huán)芳烴熒光小分子和核酸嵌入劑（核酸插入劑），普遍用作一種DNA和RNA電泳的染料。一旦與dsRNA結(jié)合，熒光增強(qiáng)20倍；與dsDNA結(jié)合，熒光增強(qiáng)20-30倍，因此，當(dāng)用低濃度EB染色（10µg/ml），都沒必要做背景脫色處理。EB用于各種核酸相關(guān)的熒光分析實(shí)驗(yàn)。也能結(jié)合ssDNA（并不是很強(qiáng)）和tsDNA。由于能結(jié)合DNA，EB也能用作一種DNA聚合酶抑制劑。EB還能與吖啶橙（AO）聯(lián)合使用來區(qū)分活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。EB在300nm和360nm處有最大紫外吸收峰，最大發(fā)射峰在590nm。
本品是溴化乙錠/EB和去離子水組成(10 mg/ml in Water)，提供溶液形式儲(chǔ)存液，可稀釋2萬倍以0.5µg/ml使用染色。
產(chǎn)品使用（電泳染色用）
1） EB通常加入凝膠和電泳緩沖液內(nèi)，工作濃度為0.5µg/ml。注意：線性化dsDNA的電泳遷移率在含EB的情況下約降低15%。
2） 凝膠跑完后用EB染色，將凝膠浸泡在含0.5µg/ml EB的電泳緩沖液或水中，室溫染30-45min。
3） 根據(jù)實(shí)際情況決定是否脫色處理。對(duì)于很微量DNA（＜10ng），通過將凝膠浸泡在水或1mM MgSO4中室溫脫色20min以去除未結(jié)合EB引起的背景熒光，能夠更容易檢測到。
注意事項(xiàng):
1） EB是一種強(qiáng)力的突變劑，操作過程中必須嚴(yán)格做好防護(hù)措施，不要有任何身體的直接接觸。
2） EB廢液也要按照實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)凈化處理再行丟棄，以避免環(huán)境污染和危害人體健康?？墒褂梦宜镜腅B去除劑對(duì)EB污染物進(jìn)行處理后再行丟棄。
3） 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
4） 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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