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核糖核酸酶A（Ribonuclease A，RNase A），一種含4個(gè)二硫鍵的單鏈多肽，分子量約為13.7 kDa。

作為一種核糖核酸內(nèi)切酶（endoribonuclease），特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）殘基。

具體來(lái)說(shuō)，切割識(shí)別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類(lèi)核苷酸3’-核糖上磷酸基團(tuán)形成的磷酸

二酯鍵，從而使得2’,3’-環(huán)磷酸水解為對(duì)應(yīng)的3’-核苷磷酸。

RNase A切割單鏈RNA活性最高，且在多種反應(yīng)條件下均有活性：在低鹽濃度（0-100 mM NaCl）下，

可用來(lái)切割單鏈RNA、雙鏈RNA以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈，而高鹽濃度（≥0.3 M）下，

RNase A僅特異性切割單鏈RNA。

核糖核酸酶A（RNase A）最常見(jiàn)的應(yīng)用在于質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過(guò)程中去除RNA，

因此制備過(guò)程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一，可采用水浴煮沸

這種傳統(tǒng)方法來(lái)滅活DNase活性。

另外，本品還可用于RNA酶保護(hù)分析、RNA序列分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

   本品以溶液形式提供，濃度為20 mg/mL。

推薦工作濃度為1-100 μg/mL，因應(yīng)用類(lèi)型的不同而異。

   用于各種常見(jiàn)的分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

   (2)確定DNA或RNA中單堿基突變的位置(Myers et al．1985，Winter et al．1985)。 在此方法中，RNA-DNA或RNA-RNA雜合體上的單堿基錯(cuò)配可被RNA酶A識(shí)別并切割。利用含SP5或T7噬菌體啟動(dòng)子的質(zhì)粒，在體外合成與野生型DNA或RNA互補(bǔ)的32p標(biāo)記RNA探針，然后與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火， 所產(chǎn)生的單堿基錯(cuò)配可用RNA酶A切割，通過(guò)凝膠電泳分析切割產(chǎn)物的大小即可確定錯(cuò)配的位置。在所有各種可能的單堿基錯(cuò)配中，大約50%可用此法確定。